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針對(duì)上述問(wèn)題，中南大學(xué)開(kāi)天瀚、丁平團(tuán)隊(duì)合作開(kāi)發(fā)了一種可響應(yīng)ROS、pH、近紅外(NIR)與電刺激(ES)四種信號(hào)的導(dǎo)電水凝膠（HEPP）：以透明質(zhì)酸（HA）-苯硼酸（PBA）-聚賴氨酸-咖啡酸為骨架，負(fù)載Ti/Pt–Pd雙金屬納米酶與葡萄糖氧化酶(PTPPG)。當(dāng)感染創(chuàng)面pH下降時(shí)，PTPPG啟動(dòng)級(jí)聯(lián)酶反應(yīng)（POD、OXD、GOx）產(chǎn)生活性氧并與溫和光熱/光動(dòng)力效應(yīng)協(xié)同殺菌并耗竭局部葡萄糖、緩解缺氧；NIR照射與ES聯(lián)合促進(jìn)血管新生并引導(dǎo)巨噬細(xì)胞由 M1 向 M2 極化；當(dāng)創(chuàng)面ROS過(guò)量時(shí)，咖啡酸多酚基團(tuán)即時(shí)清除活性氧，防止二次損傷。該水凝膠集抗菌、供氧、ROS 調(diào)控、抗炎及電刺激于一體，可為糖尿病慢性創(chuàng)面的精準(zhǔn)管理提供新策略。該文章于2025年5月8日以《An Intelligent and Conductive Hydrogel with Multiresponsive and ROS Scavenging Properties for Infection Prevention and Anti-Inflammatory Treatment Assisted by Electrical Stimulation for Diabetic Wound》為題發(fā)表于《AdvancedS Science》上（DOI：10.1002/advs.202500696）。

研究示意圖

（1）PTPPG納米顆粒的合成與表征

如圖2A所示，首先先以溶劑熱法將Ti摻入PCN-224得PCN-224(Ti)，再原位沉積Pt–Pd，最后經(jīng)表面吸附GOx形成PTPPG，使其兼具GOx、POD、CAT、OXD活性。圖2B~C PTPPG的SEM及TEM圖顯示PTPPG呈直徑約為100 nm球形的結(jié)構(gòu)。圖2D的EDS形貌表征提示C、N、O、Zr、Ti、Pt、Pd在PTPPG表面均勻分布。圖2E中Zeta電位負(fù)移證實(shí)GOx吸附且表面電荷穩(wěn)定。圖2F-K中各組分精細(xì)峰的變化及XRD中特征峰的出現(xiàn)進(jìn)一步證明了PTPPG的成功制備。圖2L顯示，PTPPG在0-100℃范圍下具有良好的熱穩(wěn)定性。

圖1. PTPPG納米顆粒的合成與表征。A) PTPPG合成流程示意圖；B) PTPPG的SEM圖；C) PTPPG的TEM圖；D) PTPPG的EDS形貌與元素分布；E) PCN-224、PCN-224(Ti)、PTPP及PTPPG的Zeta電位；F) PTPPG的XPS全譜；G) Zr 3d；H) Ti 2p；I) Pt 4f；J)Pd 3d的高分辨圖譜；K) PCN-224、PCN-224(Ti)和PTPPG的XRD圖譜；L) PTPPG的熱重曲線

（2）PTPPG的多酶活性及光響應(yīng)性

為了在體外評(píng)估PTPPG的多種酶活性，如GOx、CAT、POD、OXD和光響應(yīng)性等（圖2A）。首先，在酸性條件下，以TMB為底物驗(yàn)證了PTPPG的POD與OXD活性（圖2B）。接著利用葡萄糖作為底物，在pH 4（酸性）及pH 7.4（中性）條件下評(píng)估了其催化葡萄糖氧化的能力，結(jié)果顯示PTPPG確有良好的葡萄糖氧化能力（圖2C-D）。然后借助KMnO?檢測(cè)反應(yīng)體系，實(shí)驗(yàn)觀察到PTPPG作用后KMnO?吸光度明顯下降，證明H?O?已被有效生成（圖2E）。該吸光度的衰減在酸性條件下尤為顯著，提示PTPPG具有高效的GOx活性。最后，以Ru(ddp)（三(4,7-二苯基-1,10-菲咯啉)釕(II)二氯化物）為氧敏熒光指示劑驗(yàn)證了CAT活性，由結(jié)果可知，PTPPG與H?O?共存時(shí)，Ru(ddp)熒光被顯著猝滅，提示H?O?被分解并釋放氧氣（圖2F-G），而這也有助于緩解傷口缺氧狀態(tài)。為評(píng)估 PTPPG 的光動(dòng)力性能，采用了單線態(tài)氧傳感器綠色（SOSG）熒光探針，結(jié)果顯示，在 660 nm 激光照射下，單線態(tài)氧（1O?）的產(chǎn)量表現(xiàn)出對(duì)激光功率密度和 PTPPG 濃度的依賴性，即隨二者增加而上升（圖2H）。另外利用EPR（電子順磁共振光譜）分析進(jìn)一步確認(rèn)在反應(yīng)過(guò)程中羥基自由基（?OH）、單線態(tài)氧（1O?）和超氧陰離子自由基（?O??）的產(chǎn)生（圖2I-J）。此外，PTPPG 還展現(xiàn)出一定的光熱性能。在808 nm 近紅外激光輻照下，其表現(xiàn)出明顯的光熱效應(yīng)，溶液溫度的升高與PTPPG濃度和激光功率呈正相關(guān)（圖2K-M）。實(shí)驗(yàn)測(cè)得其光熱轉(zhuǎn)換效率可達(dá)30.1%（圖2O-P）。值得注意的是，在多次加熱-冷卻循環(huán)中，PTPPG仍能保持了良好的光熱穩(wěn)定性（圖 3N-P）。

圖2. PTPPG的多酶活性及光響應(yīng)性表征。A) PTPPG多重酶活及光響應(yīng)示意圖；B) PTPPG與H?O?及TMB共孵育驗(yàn)證氧化酶/過(guò)氧化物酶活性；C)以TMB/OPD為底物分別測(cè)定pH 4及D）pH7.4下PTPPG的葡萄糖氧化酶活性；E) KMnO?驗(yàn)證葡萄糖氧化反應(yīng)產(chǎn)H?O?；F) PCN-224、PCN-224(Ti)、PTPP及PTPPG的Zeta電位；F) Ru(ddp)驗(yàn)證PTPPG催化H?O?產(chǎn)氧；G）Ru(ddp)實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)PTPPG在H?O?或Glu存在下的氧氣生成；H）SOSG探針檢測(cè)PTPPG光動(dòng)力產(chǎn)1O?；I）EPR捕獲?OH、1O?、?O??自由基；J）660 nm激光照射前后的EPR對(duì)比；K）808 nm激光照射下不同濃度PTPPG紅外熱成像；L）不同PTPPG濃度下的升溫曲線；M）不同功率下的升溫曲線；N）808 nm激光（0.9 W）下，五次循環(huán)加熱/冷卻穩(wěn)定性；O）100 μg mL?1 PTPPG在808 nm（0.9 W）照射及關(guān)閉后的溫度變化；P）?ln(θ)與時(shí)間線性擬合求光熱轉(zhuǎn)換效率

（3）HEPP的合成與表征

如圖3A所示，水凝膠HEPP由動(dòng)態(tài)席夫堿鍵、硼酸酯鍵及PDA@PPY構(gòu)建，前體OHA-PBA通過(guò)OHA與3-NH?-PBA反應(yīng)獲得。圖3（B-E）中各物質(zhì)核磁特征峰及紅外吸收峰的變化證實(shí)OHA-PBA及EC成功合成。圖3（F-I）的SEM顯示HE呈三維網(wǎng)絡(luò)，而HEPP因PDA@PPY與PTPPG摻雜表面會(huì)更加粗糙。圖3（J-K）結(jié)果顯示在進(jìn)行吸水實(shí)驗(yàn)時(shí)，HE及HEPP在快速吸液（前30 min）后趨于平衡，其中HEPP吸水略低于HE，但在干燥后保水相近。圖3(L-N)結(jié)果分析可知，PTPPG在低pH、高H?O?及高葡萄糖條件下釋放加速，而這主要?dú)w因于于希夫堿鍵在酸性環(huán)境中的質(zhì)子化以及ROS的增加。圖3O顯示HEPP的壓縮模量是HE的2.4倍，提示PDA@PPY和PTPPG的摻入增強(qiáng)了水凝膠的交聯(lián)點(diǎn)，而這也在一定程度上為水凝膠提供一定的機(jī)械彈性和適應(yīng)性。圖3P顯示HEPP在約85%應(yīng)變時(shí)出現(xiàn)了凝膠點(diǎn)。圖3Q顯示在0.1–10 Hz的頻率條件下下，HEPP和HE的儲(chǔ)能模量（G′）始終高于損耗模量（G″），提示其具有良好的彈性，且HEPP的儲(chǔ)存模量（G′）明顯高于HE的，提示其具有良好的機(jī)械性能。圖3R顯示大應(yīng)變條件下（250%），水凝膠的交聯(lián)網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)可被破壞，但在應(yīng)變恢復(fù)到1%時(shí)，其G′和G″能迅速恢復(fù)到初始狀態(tài)，提示水凝膠具有優(yōu)異的自愈合能力。另外，由圖3(S-T)可知，HEPP在體外對(duì)DPPH和ABTS自由基的清除率均達(dá)90%，提示其具有良好的抗氧化能力。該研究制備的HEPP整合了光/電/pH/ROS響應(yīng)，具智能敷料應(yīng)用前景。

圖3. HEPP的合成與表征。A) HEPP合成流程示意圖；B) OHA-PBA及C) EC的1H NMR譜；D) OHA-PBA及E) EC的FT-IR光譜； F- I) 不同放大倍數(shù)下HE和HEPP的SEM圖像；J) HEPP和HE的吸水曲線；K) HEPP和HE的保水曲線；L) PTPPG在不同pH值、M) H2O2及N) Glu濃度下的釋放速率；O) HE與HEPP的粘接強(qiáng)度；P) HE和HEPP在0.1 Hz頻率下的應(yīng)變響應(yīng)流變行為分析。Q) 1%應(yīng)變條件下HE和HEPP的頻率響應(yīng)流變特性；R)在低（1%）和高（250%）應(yīng)變下對(duì)GHM水凝膠的應(yīng)變?cè)囼?yàn)；S) HEPP對(duì)DPPH 及T) ABTS的清除作用

（4）HEPP的體外抗菌活性

糖尿病患者的傷口更容易受到微生物感染，但巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞能夠通過(guò)產(chǎn)生高水平的活性氧（ROS）來(lái)清除入侵的微生物。感染部位局部酸度的降低（由細(xì)菌的存在所引發(fā)）會(huì)導(dǎo)致在不同pH水平上斷裂席夫堿鍵。釋放出的PTPPG有助于分解谷氨酸，隨后產(chǎn)生過(guò)氧化氫，并導(dǎo)致硼酸鍵的斷裂。這一過(guò)程促進(jìn)了 PTPPG 在傷口部位的積累，從而促進(jìn)了與糖尿病相關(guān)的傷口中ROS的自我級(jí)聯(lián)抗菌作用。圖4A展示了HEPP會(huì)通過(guò)光觸發(fā)而產(chǎn)生協(xié)同抗菌效果的作用機(jī)制，研究時(shí)選取革蘭氏陽(yáng)性菌（金黃色葡萄球菌SA、耐甲氧西林金黃色葡萄球菌MRSA）及革蘭氏陰性菌（銅綠假單胞菌PA、多重耐藥銅綠假單胞菌MDR-PA）作為代表性菌株進(jìn)行評(píng)估。如圖4B所示，經(jīng)660 nm激光照射處理的樣品組，其600 nm處吸光度較對(duì)照組顯著降低，對(duì)上述四種細(xì)菌的抗菌率均高于75%。如圖4C所示，在0.9 W下進(jìn)行5 min的80 8nm激光照射后，細(xì)菌在600nm處的吸光度降低了約 93%。為了模擬由活性氧引發(fā)的傷口區(qū)域的抗菌反應(yīng)，使用了 20 mM的Glu,隨著HEPP 在PTPPG中的負(fù)載量增加，600 nm處OD值呈濃度依賴性下降。因此，圖4D通過(guò)比較600 nm處的細(xì)菌存活率，驗(yàn)證了納米酶在傷口部位自我級(jí)聯(lián)抗菌活性的可能性。此外，圖4E使用細(xì)菌活/死熒光染色來(lái)檢測(cè)HEPP的綜合光動(dòng)力、光熱和化學(xué)動(dòng)力學(xué)抗菌特性。而通過(guò)圖4F細(xì)菌菌落計(jì)數(shù)和定量熒光分析圖表明，這三種療法的組合顯示出了最為顯著的抗菌效果。如圖4G所示，掃描電子顯微鏡圖像顯示，接受光動(dòng)力療法/光熱療法/光催化療法處理的耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）和多重耐藥肺炎鏈球菌（PDR-PA）的細(xì)菌出現(xiàn)了正常的細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)破壞以及破裂的跡象。綜合來(lái)看，這些發(fā)現(xiàn)表明HEPP具有顯著的抗菌特性，并在預(yù)防傷口處的細(xì)菌感染方面具有重要的應(yīng)用潛力。

圖4. HEPP的體外抗菌活性。A)抗菌活性的多種機(jī)制的示意圖。B)用660 nm激光；C)808 nm激光及D）Glu處理或未處理5 min的革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽(yáng)性菌的OD 600 nm值；E）活/死染色細(xì)菌的熒光圖像及F）在用不同條件處理后，在PBS（pH 7.4）中的SA、MRSA、PA和PDR-PA的相應(yīng)定量統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果；G）使用HEPP進(jìn)行不同處理的細(xì)菌的SEM圖像

（5）通過(guò)ES輔助的HEPP進(jìn)行微環(huán)境和炎癥調(diào)節(jié)

為了評(píng)估PTPPG、HEP和HEPP的生物相容性，對(duì)水凝膠進(jìn)行了劃痕測(cè)試，以評(píng)估其在體外促進(jìn)成纖維細(xì)胞遷移的能力（圖5A）。圖5B顯示，在培養(yǎng)24 h后，相比于對(duì)照組（20.6%），PTPPG 組（26.7%）、HEP 組（28.0%）和 HEPP 組（46.0%）顯示出了優(yōu)異的劃痕愈合能力。在660 nm激光照射的條件下添加PTPPG會(huì)導(dǎo)致活性氧濃度顯著增加。然而，經(jīng)過(guò)4 h的處理后，與對(duì)照組相比，細(xì)胞內(nèi)的ROS水平顯著降低。此外，由圖5C流式細(xì)胞術(shù)分析結(jié)果可知，納米顆粒與光動(dòng)力療法的級(jí)聯(lián)反應(yīng)會(huì)導(dǎo)致RAW264.7 細(xì)胞中的ROS水平顯著升高。而水凝膠的孵育可顯著降低細(xì)胞中的ROS水平，這也有效避免了與ROS水平升高相關(guān)的潛在不良后果。如圖5D所示，研究采用電刺激（0–1000 mV，步進(jìn)250 mV）處理 RAW264.,巨噬細(xì)胞以探究 HEPP 在調(diào)控炎癥微環(huán)境中的作用，由圖5（E-H）的結(jié)果分析可知，當(dāng)細(xì)胞同時(shí)接受HEPP和電刺激處理時(shí)，其從M1型表型向M2型表型的轉(zhuǎn)變最為顯著，這也表現(xiàn)在CD86的表達(dá)降低，而CD206的表達(dá)增加。為了驗(yàn)證 HEPP緩解傷口缺氧的能力，使用了細(xì)胞內(nèi)缺氧指示劑Ru(dpp)來(lái)可視化人類臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（HUVEC）和NIH-3T3細(xì)胞的細(xì)胞氧合情況。如圖5（I-J）所示，HUVEC和NIH-3T3細(xì)胞在沒(méi)有材料處理的情況下均顯示出明顯的紅色熒光，表明在缺氧處理后細(xì)胞的氧合水平相對(duì)較低。而相比于實(shí)驗(yàn)組，經(jīng)過(guò)處理后細(xì)胞的熒光強(qiáng)度顯著降低，這表明細(xì)胞氧合水平提高，這也進(jìn)一步體現(xiàn)了HEPP緩解傷口缺氧的能力。為了進(jìn)一步深入了解ES對(duì)細(xì)胞因子誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞極化的作用機(jī)制，我們采用定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（q-PCR）來(lái)研究信使RNA（mRNA）表達(dá)的變化。結(jié)果表明，TNF-α和IL-6的表達(dá)呈協(xié)同降低，而 IL-10和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β（TGF-β）的表達(dá)則呈協(xié)同升高，如圖5（K-N）所示。此外，用ES 和HEPP處理后，缺氧誘導(dǎo)因子（HIF-1α）的表達(dá)出現(xiàn)下調(diào)，這表明缺氧微環(huán)境得到了緩解（圖5O）。

圖5. 通過(guò)ES輔助的HEPP進(jìn)行微環(huán)境和炎癥調(diào)節(jié)。A) HUVEC的劃痕顯微圖和B)不同處理后HUVEC遷移率的相應(yīng)定量直方圖；C)不同處理?xiàng)l件下RAW264.7細(xì)胞DCFH-DA熒光的流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果；D) ES處理巨噬細(xì)胞調(diào)節(jié)炎癥表型示意圖；E）不同處理?xiàng)l件下RAW264.7細(xì)胞CD86及F）CD206表達(dá)的免疫熒光染色；G）RAW264.7細(xì)胞中CD86及H）CD206相對(duì)熒光強(qiáng)度的測(cè)定；I）Ru（dpp）對(duì)NIH-3T3和HUVEC細(xì)胞經(jīng)不同材料處理后溶解O₂的熒光圖像及J）相對(duì)熒光強(qiáng)度進(jìn)行評(píng)價(jià)；K-O) qRT-PCR分析不同處理后RAW264.7細(xì)胞中TNF-α、IL-6、TGF-β、IL-10和HIF-1α對(duì)應(yīng)的mRNA表達(dá)

（6）使用HEPP對(duì)ES輔助炎癥調(diào)節(jié)的RNA測(cè)序分析

為了探究HEPP和ES在調(diào)節(jié)炎癥過(guò)程中的作用，研究進(jìn)行了RNA測(cè)序分析。實(shí)驗(yàn)對(duì)接受HEPP治療、ES治療以及兩者聯(lián)合治療的各組RAW264.7細(xì)胞進(jìn)行了分析，實(shí)驗(yàn)比較了M1極化（M1組）、ES組以及HEPP+ES的RAW264.7細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄組差異。圖6A結(jié)果表明，M1、ES和HEPP+ES組共同顯示出 4238個(gè)差異表達(dá)基因。此外，ES組存在560個(gè)特異性差異表達(dá)基因，而HEPP+ES 組則包含749個(gè)特異性差異表達(dá)基因。圖6B顯示了M1和ES組之間表達(dá)顯著變化的差異基因的分布情況。在ES處理后，共有115個(gè)顯著基因表出現(xiàn)了表達(dá)變化，其中52個(gè)基因顯示出顯著增加，63個(gè)基因則顯示出顯著減少。而在使用HEPP與ES聯(lián)合治療后，共發(fā)現(xiàn)159個(gè)關(guān)鍵差異基因，其中57個(gè)基因的表達(dá)水平顯著升高，而102個(gè)基因的表達(dá)水平則大幅降低（圖6C）。圖6D突出了M1組和HEPP+ES組之間特定基因活動(dòng)的差異。紅色表示基因活性增加，藍(lán)色表示基因活性降低。為了確定治療后與免疫反應(yīng)相關(guān)的信號(hào)通路，分別對(duì)ES組和HEPP+ES組的差異表達(dá)基因進(jìn)行了KEGG分析。如圖6（E-F）所示，結(jié)果表明TNF和NF-κB信號(hào)通路存在顯著差異，這些通路與 ES 組和 HEPP+ES 組中的炎癥反應(yīng)有關(guān)。如圖6G所示，相比于M1組，ES組中TNF和IL-6 基因的表達(dá)更為明顯，提示這兩個(gè)基因在控制炎癥反應(yīng)方面的關(guān)鍵作用。圖6H顯示，與M1組相比，HEPP+ES組中TNF基因表達(dá)顯著占優(yōu)，且兩組均顯示NF-κB1基因表達(dá)上調(diào)。如圖6（J-K）所示，相較于M1組，ES組和HEPP+ES組的TNF信號(hào)通路均顯著下調(diào)；其中以HEPP+ ES組的下調(diào)幅度更大，表明該組中TNF通路受到更強(qiáng)的抑制。此外，圖6（L-M）結(jié)果表明，NF-κB信號(hào)通路在ES組和HEPP+ES組中也呈現(xiàn)下調(diào)趨勢(shì)。

圖6. 使用HEPP對(duì)ES輔助炎癥調(diào)節(jié)的RNA測(cè)序分析。A）韋恩圖展示了M1、ES和 HEPP+ES組之間的差異基因計(jì)數(shù)；B-C）火山圖分別展示了ES組與M1組以及HEPP+ES組與M1組之間的差異表達(dá)基因；D）M1組與ES+HEPP差異表達(dá)基因熱圖；E-F）EGG富集ES vs M1及HEPP+ES vs M1前20通路；G-H）TNF與NF-κB1通路差異基因PPI網(wǎng)絡(luò)I）GO富集分析顯示的前30條相關(guān)通路；J-M）GSEA 分析TNF和NF-κB通路

（7）HEPP對(duì)傷口的治療效果

最后將HEPP應(yīng)用于糖尿病小鼠傷口模型以評(píng)估它們?cè)隗w內(nèi)的抗菌、控炎及增強(qiáng)傷口愈合過(guò)程的療效。圖7A所示為糖尿病小鼠背部圓形創(chuàng)面模型的建立及給藥流程圖，圖7B中小鼠空腹血糖≥16.7 mmol·L?1被確定位模型成功構(gòu)建，且小鼠伴隨體重輕度下降（圖7C）。在此基礎(chǔ)上，圖7D體外實(shí)驗(yàn)表明HEPP可迅速形成凝塊，證實(shí)其具有快速止血性能。隨后，借助808 nm激光對(duì)創(chuàng)面進(jìn)行連續(xù)12 d的溫度監(jiān)測(cè)，結(jié)果顯示HEPP組溫升顯著高于PBS對(duì)照，直接證明了PTPPG自敷料的可持續(xù)釋放（圖7E–F）。而后分析圖7G-H的結(jié)果可知，7 d時(shí)HEPP單獨(dú)處理組創(chuàng)面剩余面積仍達(dá)26.8%，與PBS組（34.7%）差異有限；相比之下，HEPP聯(lián)合660 nm+808 nm激光與電刺激組創(chuàng)面僅余4.6%，至12 d幾近完全愈合。在安全性評(píng)價(jià)方面，圖7I實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明1 mg mL?1 PTPPG及HEPP的溶血率均低于5%，符合國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)，提示其優(yōu)異的生物相容性。

圖7. HEPP對(duì)傷口的治療效果。A）用于糖尿病傷口建立的小鼠模型創(chuàng)建示意圖；B）建模及治療過(guò)程中的血糖水平及C）體重水平；D）HEPP的止血特性；E）HEPP治療過(guò)程中PTPPG釋放的響應(yīng)性光熱成像；F）使用和未使用HEPP治療的傷口溫度變化；G）接受不同治療的小鼠糖尿病傷口進(jìn)展的圖像；H）不同組別相對(duì)傷口面積的變化；I）不同材料的溶血實(shí)驗(yàn)

另外，實(shí)驗(yàn)通過(guò)組織化學(xué)染色和免疫熒光技術(shù)深入研究了其傷口愈合的機(jī)制。如圖8A所示，HEPP＋660＋808＋ES組在術(shù)后第12天已重建完整表皮與真皮，并伴隨顯著的新生血管與毛囊生成；圖8B的Masson染色進(jìn)一步證實(shí)，該組膠原纖維致密且排列高度有序。在此基礎(chǔ)上，圖8C–E通過(guò)免疫熒光揭示，HEPP＋660＋808＋ES組的CD86表達(dá)最低而CD206表達(dá)最高，提示巨噬細(xì)胞由M1型向M2型有效極化；另外，由圖8F–I定量結(jié)果可知，促炎因子TNF-α與IL-6顯著下調(diào)，而抗炎因子IL-10與TGF-β顯著上調(diào)，這些進(jìn)一步證明了傷口部位炎癥的顯著緩解。圖8J-K進(jìn)一步利用VEGF與CD31雙標(biāo)記證實(shí)了HEPP＋660＋808＋ES組新生血管密度顯著高于其余各組，而這種變化對(duì)于向代謝活躍的傷口供應(yīng)必要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和氧氣至關(guān)重要。

圖8.染色法對(duì)傷口愈合機(jī)理研究。A）組織的H&E染色；B）組織的Masson染色；C）糖尿病傷口部位的組織切片中CD86、CD206、IL-6、IL-10、TNF-α、TGF-β、CD31和VEGF的免疫熒光分析；D-K）定量分析不同處理后的CD86、CD206、IL-6、IL-10、TNF-α、TGF-β、CD31和VEGF的平均熒光強(qiáng)度